产品简介
本产品使用两种荧光探针，FAM和HEX，分别检测支原体目标序列和内参对照。FAM通道特异性检测支原体，HEX通道检测内参对照。内参对照可在PCR反应阶段加入，用于排除因样品中含有PCR抑制因素导致的假阴性结果；也可在样品提取阶段加入，用于评估提取效果，排除提取不当而导致的假阴性。
本产品能够与本公司的两款核酸提取试剂盒搭配使用，提取样品中的支原体DNA，排除不同样本基质的干扰，提高检测的灵敏度。
产品规格
产品货号：MY0001-50
产品规格：50T/盒
试剂盒组成
| 试剂名称 | 规格（50T) | 主要成分 |
5×反应液 | 250μL/管×1管 | 反应缓冲液、引物、探针、dNTPs |
酶 | 12.5μL/管×1管 | Taq DNA聚合酶 |
阳性对照 | 200μL/管×1管 | 猪鼻支原体质粒模板 |
内参对照 | 500μL/管×1管 | 内参质粒模板 |
水 | 1000μL/管×1管 | DEPC处理水 |
检测结果
本试剂盒设置阴性对照、阳性对照作为质控，跟踪待测样本的检测，扩增曲线示例见图1。
图1阴性对照和阳性对照扩增结果示例
产品性能
1. 检测限
使用中国药典、EP2.6.7、USP<63>、JP G3等规定的支原体物种作为模板测定，这些支原体有不同的来源，存在不同模板单位上的验证结果。
物种 | 检测限 |
口腔支原体（Mycoplasma orale） | ≤10CFU/ml |
猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis） | ≤5GC/反应 |
肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae） | ≤1.21fg/反 |
莱氏无胆甾原体（Acholeplasma laidlawi） | ≤0.5fg/反应 |
发酵支原体（Mycoplasma fermentans） | ≤5fg/反应 |
精氨酸支原体（Mycoplasma arginini） | ≤5fg/反应 |
唾液支原体（Mycoplasma salivarium) | ≤0.5fg/反应 |
2. 特异性
该qPCR试剂盒也可检测更多的柔膜体物种（见下表），但不会检测到进化树上相关的其他物种，如梭菌、乳杆菌和链球菌，和其他细菌和细胞DNA均无交叉反应。
能检测到的其他柔膜体 | 经检测，不会产生交叉反应的物种 | ||
欧洲药典列举的细菌 | 其他细菌 | 细胞 | |
生殖支原体 | 丙酮丁醇梭菌 | 金黄色葡萄球菌 | 293细胞DNA |
人型支原体 | 嗜酸乳杆菌 | 铜绿假单胞菌 | NK细胞DNA |
解脲脲原体 | 肺炎链球菌 | 枯草芽孢杆菌 | 干细胞DNA |
微小脲原体 | 大肠杆菌 | ||
白色念珠菌 | |||
黑曲霉 | |||
参照EP2.6.7的NAT验证指南相关的验证，还在进一步完善中。
